https://www.tecsrg.co.jp/

サービス

アンプリコンシーケンスデータ解析(QIIME2)

  • Amplicon Sequence Variant (ASV) 法により、相同率の高い近縁種同士の識別が可能

  • 学術論文で求められる二次解析(多様性解析や統計解析の機能)が充実

サービス概要

試験項目
アンプリコンシーケンスデータ解析 (QIIME2) 一次解析/二次解析/一次解析~二次解析
受入可能な検体
次世代シーケンサー (NGS) によるシーケンス生データ
目安納期
10 営業日~

QIIME21)は代表配列の決定から多様性解析まで、アンプリコンシーケンス解析に必要なソフトウェアをまとめたオープンソースの解析パイプラインです。解析結果はqzvという独自のファイル形式になり、専用のwebサイトQIIME 2 View2)で閲覧でき、前身のQIIME13)と比べデータのアウトプットにおいてGUI的な側面も強化されています。
QIIME2がQIIME1と大きく異なる点は、代表配列の決定方法にあります。QIIME1で用いられるOperational Taxonomic Unit (OTU) 化は、一定の相同率 (例えば97%以上) の配列同士を同種由来とみなして代表配列をまとめていく方法です。一方、QIIME2のASV法は、数塩基の差異しかない配列同士について、その差異がPCRやシーケンシングの過程で生じたエラーに起因するのか、種内変異等の生物学的なイベントによるものなのかを統計学的に区別する代表配列決定法です。これにより、今まで「相同率97%だが実は別種であった可能性のある配列」を区別することで、より解像度の高いデータ解析を可能としています。


〈参考文献〉
1) Bolyen E, Rideout JR, Dillon MR, Bokulich NA, Abnet CC, et al. Reproducible, interactive, scalable and
extensible microbiome data science using QIIME 2. Nat Biotechnol 2019;37:852–857.
2) https://view.qiime2.org/
3) Caporaso JG, Kuczynski J, Stombaugh J, Bittinger K, Bushman FD, et al. QIIME allows analysis of high-throughput community sequencing data. Nat Methods 2010;7:335–336.

受入可能な検体

検体の種類対象
次世代シーケンサー (NGS) によるシーケンス生データfastq ファイル
fasta ファイル

解析プロセス

fastqデータSample Typeの入力
プライマー配列の除去
代表配列の決定(ASV法)
相同性検索
多様性解析
統計解析

仕様・納品内容(一次解析)

〈仕様〉

一次解析ASV アルゴリズムDADA2
解析データベース細菌、アーキア:Greengenes あるいは SILVA
カビ、酵母:UNITE
推定可能な分類階級界~種

〈納品内容〉

一次解析代表配列とリード数の一覧qzv ファイル
相同性検索結果(表、 バーチャート)

仕様・納品内容(二次解析)

〈仕様〉

二次解析α多様性指数chao1, shannon, simpson
α多様性指数の統計解析Kruskal-Wallis 検定
β多様性の距離測定法unweighted-unifrac, weighted-unifrac, bray-curtis
β多様性の統計解析ANOSIM 検定
2D 主座標プロット描画R (tidyverse, qiime2R)
ヒートマップ ・ クラスター分析Ward 法

〈納品内容〉

二次解析αレアファクションカーブおよび統計解析結果(箱ひげ図)qzv ファイル
3D主座標分析結果および統計解析結果(箱ひげ図)qzv ファイル
2D主座標プロットpdf ファイル
ヒートマップ・クラスター分析結果qzv ファイル

報告サンプル(セット2:QIIME2)

相同性検索結果(表、 バーチャート)

QIIME2_バーチャート

αレアファクションカーブ

αレアファクションカーブ

3D主座標分析

3D主座標分析

価格・納期

 遺伝子機能の予測解析をご希望の場合には、「PICRUSt2による予測メタゲノム解析」をご参照下さい。

試験項目検体数単位単価 (税抜)目安納期
アンプリコンシーケンスデータ解析 (QIIME2) 一次解析3 ~ 30,000 円10 営業日
アンプリコンシーケンスデータ解析 (QIIME2) 二次解析30,000 円
アンプリコンシーケンスデータ解析 (QIIME2) 一次解析~二次解析60,000 円


依頼書のダウンロード

ご依頼前の同意事項

  • メディア(DVD-R)による配送納品のみとなります。
  • ご依頼前の同意事項(共通)を必ずご確認下さい。
  • ご依頼前の解析手法などの選択についてのアドバイスには可能な範囲で対応しますが、最終的な選択はお客様の責任にてご判断下さい。

213-2_Data_analysis_QIIME2&PICRUSt2_v5.zip

依頼書をダウンロードする

初めてのご依頼の際には、お客様登録をしていただく必要があります。詳細はこちら。

contact

ご依頼・お見積り・技術的なご相談など、お気軽にお問い合わせください。

お電話でのお問い合わせ054-349-6155(平日09:00〜17:00)

テクノスルガ・ラボについてさらに詳しく知りたい方へ