糞便理化学分析

説明

「腸内環境と宿主の健康との関わり」を明らかにするためには、腸内細菌叢と代謝物の関係を深く理解することが望まれます。
腸内細菌叢解析に加えて、腸内代謝物分析、さらにIgA 産生や胆汁酸分泌などの宿主側の応答の評価など、多面的な研究が世界中で盛んに行われています。ヒト糞便の他に、マウス・ラット糞便、消化管内容物などの分析が可能です。

腸内において有機酸 (短鎖脂肪酸) は、腸管内を酸性に保ち、腸の蠕動運動や腸管からの水の分泌を促進するほか、感染防御、腐敗産物の生産抑制、便性・便通の改善効果を持つことが知られています。有機酸は、腸内細菌による食物繊維や炭水化物の代謝物であり、タンパク質やペプチドの消化でも増加することが知られており、腸内細菌叢と共に評価することが望まれます。

酢酸、プロピオン酸、酪酸などの短鎖脂肪酸は、宿主の短鎖脂肪酸の受容体 (GPR41、GPR43 など) を介して肥満や糖尿病に関連することが近年報告されています。

例えば、GPR41 は主にプロピオン酸と酪酸により活性化され、交感神経系を介して、エネルギー恒常性の維持に関わることが報告されています。また、GPR43 は酢酸とプロピオン酸によって活性化され、エネルギーの白色脂肪組織への取り込みを抑制し、脂肪の蓄積を抑えていると報告されています。

試験・報告内容、必要検体量

項目 対象成分、報告内容 定量下限値

分析必要量

ヒト・マウス・ラット

分析機器、または

測定・分析方法

有機酸分析 酢酸、プロピオン酸、コハク酸、乳酸 0.05 mg/g 50~100 mg LC
(pH緩衝化ポストカラム電気伝導度検出法)
iso-酪酸、iso-吉草酸、n-酪酸、
n-吉草酸、ギ酸
0.1 mg/g
短鎖脂肪酸分析 iso-酪酸、iso-吉草酸、n-吉草酸、
n-カプロン酸
0.3 µmol/g 50~100 mg
GC-FID
プロピオン酸、n-酪酸 0.7 µmol/g
酢酸 2.0 µmol/g

胆汁酸はコレステロール代謝、脂溶性成分の消化吸収、界面活性による腸内細菌叢の変化に関与しています。腸内細菌により大腸がんの発がんプロモーターといわれている二次胆汁酸へと代謝されます。

試験・報告内容、必要検体量

項目 対象成分、報告内容 定量下限値

分析必要量

ヒト・マウス・ラット

分析機器、または測定・分析方法

胆汁酸分析

遊離胆汁酸:
イソデオキシコール酸、
ウルソデオキシコール酸、
ケノデオキシコール酸、コール酸 、
デオキシコール酸、デヒドロコール酸、
ヒオデオキシコール酸、リトコール酸、
α, β, ωムリコール酸


抱合型胆汁酸:
タウロコール酸、
タウロケノデオキシコール酸、
タウロデオキシコール酸、
タウロウルソデオキシコール酸、
タウロβ-ムリコール酸、
グリココール酸、
グリコケノデオキシコール酸、
グリコデオキシコール酸

0.02 ~ 0.3 μmol/g 50~100 mg LC-QTOF MS

腐敗産物は、糞便の悪臭の原因と言われ、腸内環境の悪化を示す指標として知られています。腸内細菌によりチロシンからフェノール類が作られ、トリプトファンからインドールやスカトールが作られます。産出されたフェノール類の多くは血液を介して表皮形

成過程に悪影響を及ぼすことから、肌荒れを起こす要因の一つに挙げられています。

試験・報告内容、必要検体量

項目 対象成分、報告内容 定量下限値

分析必要量

ヒト・マウス・ラット

分析機器、または

測定・分析方法

腐敗産物分析

フェノール類
(p-クレゾール、フェノール、
4-エチルフェノール)、インドール、
スカトール

0.3 μg/g 50~100 mg GC-MS

肝不全、肝硬変、尿毒症などの肝臓に関わる疾患は、アンモニアを尿素に合成する肝臓の解毒機能を低下させるため、血液中にアンモニアが増加することが知られています。食餌品に含まれるタンパク質や消化管への分泌液に含まれる尿素は、腸内細菌によって分解されてアンモニアに代謝されます。腸内環境を改善することで糞便中のアンモニア量を低減できたとの報告も多くあります。

試験・報告内容、必要検体量

対象成分、報告内容 定量下限値

分析必要量

ヒト・マウス・ラット

分析機器、または

測定・分析方法

アンモニア分析

アンモニウムイオン
(アンモニア濃度に換算)

0.5 μg/g 50~100 mg イオンクロマトグラフィ-

腸内のpH は、低いほど便の色は黄色っぽく、pH7.0(中性)を越えると茶色っぽく、pH8.0(弱アルカリ性)になると黒っぽくなります。赤ちゃんのpH は4.5~5.5(弱酸性)で黄色、健康な大人のpH は5.5~6.0 で黄土色です。大腸菌 (E.coli)、ウェルシュ菌(Clostridium perfringens)などの悪玉菌は、アルカリ性の腸内環境を好んで発育し、pH6.0 以下(弱酸性)になると発育しにくくなります。

試験・報告内容、必要検体量

対象成分、報告内容 定量下限値

分析必要量

ヒト・マウス・ラット

分析機器、または

測定・分析方法

pH 測定

pH

50~100 mg pH 計 (ガラス電極法)

糞便は、腸内貯留時間が長いと水分が腸管に吸収されて硬くなり、反対に腸内貯留時間が短いと水分が腸管に吸収されず、柔らかくなります。水分が70%未満では排便時に苦痛を感じるようになり、80%以上になると軟便となり、90%を超えると水様便となります。水分は、pH と負の相関があります。

試験・報告内容、必要検体量

対象成分、報告内容 定量下限値

分析必要量

ヒト・マウス・ラット

分析機器、または

測定・分析方法

水分測定

水分

0.5~1 g 乾燥法

腸管には全末梢リンパ球の約70%に相当する免疫系細胞が存在しており、腸内細菌が宿主の消化管に定着することによって、免疫系が刺激・活性化されていると考えられています。小腸粘膜面での微生物に対する特徴的な応答に免疫グロブリンの一種であるIgA 産生があり、これはプロバイオティクス乳酸菌の摂取により亢進し、感染防御へとつながることが期待されています。ヒト以外の動物種のIgA 分析については、お問い合わせ下さい。

試験・報告内容、必要検体量

項目 対象成分、報告内容 定量下限値

分析必要量

ヒト・マウス・ラット

分析機器、または

測定・分析方法

IgA 分析

IgA

1 μg/g 50~100 mg ELISA 法

糞便理化学分析の前処理または保存のために、糞便を加熱後または非加熱で凍結乾燥を行い、その便をステンレスビーズを使用して粉砕いたします。

1 検体につき生便湿重量1g の凍結乾燥・粉砕を行います。凍結乾燥便重量は、水含量に依存するため保証いたしていません。生便湿重量1g 以上の検体の凍結乾燥・粉砕をご希望の場合にはお問い合わせ下さい。

試験・報告内容、必要検体量

項目 対象成分、報告内容 定量下限値

分析必要量

ヒト・マウス・ラット

分析機器、または

測定・分析方法

凍結乾燥粉砕便作製

水分、乾燥便重量

0.5~1.5 g 凍結乾燥

検体送付方法、糞便検体の返送

必要検体量・送付方法は、以下の表より【生体由来検体】をご参考下さい。

検体の種類 必要量 留意点および送付方法
環境検体  活性汚泥 5~10mL 採取後速やかに冷蔵保存、冷蔵輸送
 土壌
堆肥
コンポスト
1~5g
 環境水
(海水、地下水など)
100mL~1L
 培養液 5~10mL
生体由来検体 A区分 糞便
腸管内容物
採便容器(保存液なし)
もしくは
気密性の高い容器
0.2~0.5g 採取後速やかに冷凍保存、冷凍輸送
採便容器(保存液あり)   採取後速やかに冷蔵保存、冷蔵輸送推奨、常温輸送可
B区分  A区分以外
口腔内容物
唾液
プラーク

皮膚表面採取物など
1.5mLチューブなど 0.2~1mL(唾液) 綿棒やコットンなどで広範囲を拭き取った検体は、極少量の適切な溶液(PBS、生理食塩水、滅菌水など)に移し、速やかに冷蔵保存、冷蔵輸送
DNA抽出物 濃度:10ng/µL
総量:20µL以上
採取後速やかに冷蔵保存、冷蔵輸送

必要検体量・送付方法は、以下の表より【生体由来検体】をご参考下さい。

糞便検体の返送を希望のお客様には、定温マルチBOX による臨床検体輸送サービスを利用してお送りいたします。

項   目 容器有効内寸 単位 価格
糞便検体返送(冷凍) 最大:500 mm×500 mm×450 mm 1個 43,000円~

価 格 ・ 納 期

項目 検体数 単 位 単価
糞便中有機酸分析 1~3 検体 26,000円
4~6 検体 17,000円
7~29 検体 13,000円
30~ 検体 10,000円
糞便中短鎖脂肪酸分析 1~3 検体 22,000円
4~6 検体 14,000円
7~29 検体 10,000円
30~ 検体 7,000円
糞便中胆汁酸分析 1~3 検体 70,000円
4~6 検体 43,000円
7~29 検体 31,000円
30~ 検体 23,000円
糞便中腐敗産物分析 1~3 検体 33,000円
4~6 検体 21,000円
7~29 検体 16,000円
30~ 検体 13,000円
糞便中アンモニア分析 1~3 検体 14,000円
4~6 検体 9,000円
7~29 検体 7,000円
30~ 検体 6,000円
糞便pH測定 1~3 検体 4,200円
4~6 検体 2,900円
7~29 検体 2,400円
30~ 検体 2,000円
糞便水分測定 1~3 検体 4,300円
4~6 検体 2,900円
7~29 検体 2,300円
30~ 検体 1,900円
糞便中IgA分析 (ヒト) 1~3 検体 32,000円
4~6 検体 20,000円
7~29 検体 15,000円
30~ 検体 13,000円
糞便 凍結乾燥粉砕便作製 加熱(殺菌処理) 1~3 検体 10,000円
非加熱 1~3 検体 お問い合わせ下さい
糞便 混練作業※1、2 検体 1,000円

※1 均一化のための糞便の混練作業です。別途、処分費が必要となることがあります。詳細は当社までお問い合わせ下さい。
※2 同一検体を複数の容器でお送りいただき、それらをまとめて計量する場合、混練作業が必要な場合があります。

依頼書の入手と同意事項の確認

ご依頼前の同意事項、ご依頼前の同意事項(共通) およびテクノスルガ・ラボ基本約款 を確認してお申込み下さい。

・ 有機酸、腐敗産物は、採便後直ちに冷凍保存することで、分析対象物質が1 ヵ月間程度は安定であることを確認しています。輸送時に万が一、解凍した場合、これに伴う梱包材の軟化や破断による汚染が考えられます。発砲スチロールなどに梱包いただき、漏洩にご注意下さい。

・ マウスのように採便できる糞便量に限りがある場合には、試料の損失を防ぐため、当社指定のチューブをご利用下さい。採便後は糞便量を秤量し、凍結状態で当社までお送りいただければ、全量をそのまま分析に使用いたします。

・ 弊社採便容器をご使用いただく場合は、必ずスプーン型、保存液なしのタイプで採便し、検体は冷凍にてお送り下さい。

・ ご依頼前の同意事項(共通)を必ずご確認下さい。

分析のご依頼は、以下のファイルをダウンロード頂きお申し込み下さい。